بعد ان انتهينا من طريقة الساندويش في اليوم الثاني ونُقل البروتين الى الميمبرانا)الغشاء(وضعناها في علبة الجسم المضاد الثانوي مرتبط مع انزيم يحلل ماء االوكسجين لذلك وجود تحليل انزيمي يدل على وجود بروتين ، الانزيم مرتبط مع الجسم المضاد الثانوي والجسم المضاد الثانوي مرتبط مع الجسم المضاد االول والجسم المضاد االول فوجود نتائج لتحليل االنزيم يدل على وجود البروتين ، في معادلة تحليل االنزيم ينتج ضوء،