Lakhasly

LES STREPTOCOCCACEAE La famille des Streptococcaceae comporte les genres : Streptococcus, Enterococcus et Lactococcus Genre Streptococcus : Decouvert par Pasteur en 1879.Ils peuvent survivre longtemps dans celui-ci ; ainsi la decouverte d'enterocoques dans les eaux ou les aliments signe une contamination fecale d'origine humaine ou animale.ensemencer 01 a 02 gouttes de la suspension en BGT ou du bouillon TODD HEWITT sur : gelose au sang frais (5% de sang defibrine de cheval ou mouton) ou sur milieu selectif (gelose ANC : acide nalidixique+colimycine) Mettre un disque de la bacitracine sur la partie riche en streptocoques et un disque d'optochine a cote, respecte la distance entre les deux disques environ 4 cm. Pour l'hemoculture, en cas d'endocardite streptococcique ; Proceder de la meme facon que celle du prelevement de gorge, mais en plus : ensemencer une gelose molle de REILLY qui permet la culture en anaerobiose et incuber a 37o C pendant 24 h. faire des repiquages sur gelose au sang tous les 04 jours.La proteine T : permet le typage epidemiologique des Streptocoques de groupe A ; actuellement complete par les techniques de biologie moleculaire

5-Substances elaborees par les Streptocoques de groupe A beta- hemolytiques : Les Streptocoques produisent de nombreuses substances toxiques a pouvoir antigenique +- marque, on distingue principalement : Les toxines : La streptolysine << O >> : tres active sur les globules rouges, tres toxique et antigenique entrainant la formation des anticorps antistreptolysine << O >> (ASLO) recherches en cas du rhumatisme articulaire aigu (RAA).2-Etude bacteriologique : Morphologie : les Streptocoques du groupe A se presentent comme des cocci Gram positif spheriques ou ovoides de 0,6 a 1 u de diametre, acapsules, asporules, immobiles, isoles en diplocoques et souvent en courte chainette flexueuse, parfois longue chainette Caracteres culturaux : aero-anaerobies facultatifs, fragiles et exigeants certaines conditions pour leur culture (gelose au sang, PH optimal de 7,2 a 7,4 et temperature de 35o C a 37oC.Sur bouillon nutritif: la partie superieure du bouillon est claire avec depot granuleux en << mie de pain >> Sur BGT (Bouillon glucose tamponne) : culture abondante caracterisee par un trouble avec depot granuleux Sur gelose nutritive : petites colonies transparentes, a bord regulier dites en << goutte de rosee >> Sur gelose au sang frais : colonies entourees d'une aureole claire d'hemolyse complete bien limitee appelee hemolyse Beta 3-Caracteres biochimiques Catalase negative (caractere differentiel avec les Staphylocoques qui sont catalase positive).Une espece distincte appelee Streptococcus pneumoniae (anciennement appele diplococcus

Les especes classees en differents groupes
Classification : Selon l'aspect de l'hemolyse entourant les colonies sur gelose au sang frais, on distingue : Les Streptocoques beta-hemolytiques (lyse complete autour des colonies) Les Streptocoques alpha- hemolytiques (lyse incomplete avec reflet verdatre autour des colonies.Fermentation des sucres sans gaz (Mannitol, esculine, sorbitol, etc.) Non lyses par la bile ou sels biliaires << epreuve de NEUFELD >> Actuellement la galerie Api-Strept permet un meilleur diagnostic differentiel des Streptocoques en 24 heures.6-Diagnostic bacteriologique : Diagnostic direct : c'est la mise en evidence par l'examen direct (microscopique) et la culture sur gelose au sang frais des Streptocoques du groupe A. Les prelevements varient en fonction de la localisation de l'infection (Pvt de gorge, pus, serosites, epanchement, hemoculture).Au cas ou il n'y a pas d'elevation des ASLO : Recherche et titrage des streptodornase B (ASD B) Recherche et titrage des streptokinase (ASK) Recherche et serotypage par la methode de Miss LANCEFIELD permet de connaitre le serotype dans le groupe A qui comporte 60 serotypes.Selon la classification de LANCEFIELD basee sur la presence dans la paroi des Streptocoques du polysaccharide C (polyoside C) dont la composition et les proprietes antigeniques variables permettent de definir : 18 groupes serologiques designes de A a H et de K a T. Les Streptocoques ne possedant pas de polyoside C sont non groupables.A-Streptocoque pyogenes (Streptocoques du groupe A beta- hemolytique) 1-Habitat et pouvoir pathogene : germe strict ou commensal du pharynx et amygdales de l'homme (surtout chez l'enfant), anus, flore vaginale.La penicilline G reste l'antibiotique le plus actif sur les streptocoques de groupe B. C- streptocoques viridans (non groupables) Especes depourvues d'antigene specifique de groupe (polyoside C) , donnent parfois des colonies sur gelose au sang avec une hemolyse type alpha (verdatre).Responsables d'infections urinaires et d'endocardites, poussent facilement sur milieux ordinaires (non exigeants), sont moins sensibles aux antibiotiques que les autres Streptocoques.Les enzymes : La streptokinase (fibrinolysine) : responsable de la lyse de la fibrine en activant le plasminogene en plasmine, antigenique ; entrainant la formation d'antistreptokinase(ASK) dont le titrage est utilise pour le diagnostic du RAA.4-Structure antigenique : la constitution de la paroi des Streptocoques est tres complexe, on distingue principalement : Le polyoside C : antigene de la paroi specifique de chaque groupe selon la classification de Miss LANCEFIELD, 18 groupes sont decrits (de A a H et de K a T).Recherche de la lyse par la bile ou sels biliaires (les Streptocoques de groupe A ne sont pas lyses) caractere differentiel avec Streptocoque pneumoniae qui est lyse par la bile.Responsables d'infections bucco-dentaires, menant parfois jusqu'a l'endocardite surtout chez les sujets jeunes ayant une cardiopathie preexistante. GNA, etc.) plus rares de nos jours.etc.).

LES STREPTOCOCCACEAE
La famille des Streptococcaceae comporte les genres : Streptococcus, Enterococcus et Lactococcus
Genre Streptococcus :
Découvert par Pasteur en 1879. Les Streptocoques sont des cocci à Gram positif disposés souvent en chainette, aéro-anaérobies facultatifs à métabolisme fermentatif, catalase négative. Ce sont des germes très fragiles ; nécessitent des milieux de culture enrichis. Le genre Streptococcus comprend plusieurs espèces:
Des espèces classées en groupes différents (A, B, C, D,… etc.).

Une espèce distincte appelée Streptococcus pneumoniae (anciennement appelé diplococcus

Les espèces classées en différents groupes

Classification :
Selon l’aspect de l’hémolyse entourant les colonies sur gélose au sang frais, on distingue :
Les Streptocoques beta-hémolytiques (lyse complète autour des colonies)
Les Streptocoques alpha- hémolytiques (lyse incomplète avec reflet verdâtre autour des colonies. Ces Streptocoques sont dits « viridans »
Les Streptocoques non hémolytiques.
Selon la classification de LANCEFIELD basée sur la présence dans la paroi des Streptocoques du polysaccharide C (polyoside C) dont la composition et les propriétés antigéniques variables permettent de définir :
18 groupes sérologiques désignés de A à H et de K à T.
Les Streptocoques ne possédant pas de polyoside C sont non groupables.
A-Streptocoque pyogenes (Streptocoques du groupe A beta- hémolytique)
1-Habitat et pouvoir pathogène : germe strict ou commensal du pharynx et amygdales de l’homme (surtout chez l’enfant), anus, flore vaginale. Les maladies les plus fréquemment rencontrées sont
l’angine érythémateuse (érythémato-pultacée) streptococcique.
Les Streptococcies cutanées (impétigo, pyodermite, érysipèle, surinfection de brulures, otites)
Les Streptococcies rares et graves (Scarlatine, fièvre puerpérale, bactériémie, etc.)
Les complications post- streptococciques (RAA. GNA, etc.) plus rares de nos jours.

2-Etude bactériologique :
Morphologie : les Streptocoques du groupe A se présentent comme des cocci Gram positif sphériques ou ovoïdes de 0,6 à 1 µ de diamètre, acapsulés, asporulés, immobiles, isolés en diplocoques et souvent en courte chainette flexueuse, parfois longue chainette
Caractères culturaux : aéro-anaérobies facultatifs, fragiles et exigeants certaines conditions pour leur culture (gélose au sang, PH optimal de 7,2 a 7,4 et température de 35o C à 37oC.
Sur bouillon nutritif: la partie supérieure du bouillon est claire avec dépôt granuleux en « mie de pain »
Sur BGT (Bouillon glucosé tamponné) : culture abondante caractérisée par un trouble avec dépôt granuleux
Sur gélose nutritive : petites colonies transparentes, à bord régulier dites en « goutte de rosée »
 Sur gélose au sang frais : colonies entourées d’une auréole claire d’hémolyse complète bien limitée appelée hémolyse Beta
3-Caractères biochimiques
Catalase négative (caractère différentiel avec les Staphylocoques qui sont catalase positive).
Résistants à l’optochine (ethyl hydoxycupreine), caractère différentiel avec Streptocoque pneumoniae.
Sensibles à la bacitracine.
Fermentation des sucres sans gaz (Mannitol, esculine, sorbitol, etc.)
Non lysés par la bile ou sels biliaires « épreuve de NEUFELD »
Actuellement la galerie Api-Strept permet un meilleur diagnostic différentiel des Streptocoques en 24 heures.
4-Structure antigénique : la constitution de la paroi des Streptocoques est tres complexe, on distingue principalement :
Le polyoside C : antigène de la paroi spécifique de chaque groupe selon la classification de Miss LANCEFIELD, 18 groupes sont décrits (de A à H et de K à T). Les Streptocoques dépourvus du polyoside C sont dits non groupables. Cet antigène ne provoque pas la formation d’anticorps (non immunogène).
La protéine M : antigène spécifique de type au sein du groupe Ex : groupe A comporte 60 sérotypes d’A1, A2, ………..A60). Cet antigène est responsable de la virulence des Streptocoques, suscite la formation des anticorps (immunogène).
La protéine T : permet le typage épidémiologique des Streptocoques de groupe A ; actuellement complété par les techniques de biologie moléculaire

5-Substances élaborées par les Streptocoques de groupe A beta- hémolytiques :
Les Streptocoques produisent de nombreuses substances toxiques à pouvoir antigénique ± marqué, on distingue principalement :
Les toxines :
La streptolysine « O » : très active sur les globules rouges, très toxique et antigénique entrainant la formation des anticorps antistreptolysine « O » (ASLO) recherchés en cas du rhumatisme articulaire aigu (RAA).
La streptolysine « S » : très active et toxique, non antigénique(ne provoque pas l’apparition d’anticorps).
La toxine érythrogene : synthétisée par certaines souches de Streptocoques de groupe A, responsable de l’éruption cutanée de la scarlatine, entrainant la formation d’une antitoxine assurant une bonne immunité.
Les enzymes :
La streptokinase (fibrinolysine) : responsable de la lyse de la fibrine en activant le plasminogene en plasmine, antigénique ; entrainant la formation d’antistreptokinase(ASK) dont le titrage est utilisé pour le diagnostic du RAA.
La streptodornase(Dnase) : enzyme dépolymérisant l’ADN, il existe 04 types (A, B, C, D), seuls les anticorps anti streptodornase B qui sont élevés au cours du RAA.
La hyaluronidase : enzyme dépolymérisant le tissu conjonctif, induit la formation d’anticorps anti hyaluronidase (ASH).
6-Diagnostic bactériologique :
Diagnostic direct : c’est la mise en évidence par l’examen direct (microscopique) et la culture sur gélose au sang frais des Streptocoques du groupe A.
Les prélèvements varient en fonction de la localisation de l’infection (Pvt de gorge, pus, sérosités, épanchement, hémoculture).
Le prélèvement de gorge est le cas le plus couramment effectué au laboratoire.
Prélèvement : doit être fait très largement sur toute la surface des loges amygdaliennes à l’aide de deux écouvillons (un sert pour l’examen direct et l’autre pour la culture).
Examen direct (microscopique) : en cas d’angine streptococcique on observe de nombreuses cocci Gram positif en diplocoque ou en chainette ± longue.

Culture :
ensemencement direct à partir de l’écouvillon ou après essorage préalable de l’écouvillon dans un bouillon glucosé tamponné (BGT) ou bouillon de TODD HEWITT.
ensemencer 01 à 02 gouttes de la suspension en BGT ou du bouillon TODD HEWITT sur :
gélose au sang frais (5% de sang défibrine de cheval ou mouton) ou
sur milieu sélectif (gélose ANC : acide nalidixique+colimycine)
Mettre un disque de la bacitracine sur la partie riche en streptocoques et un disque d’optochine à coté, respecté la distance entre les deux disques environ 4 cm.
Pour l’hémoculture, en cas d’endocardite streptococcique ;
Procéder de la même façon que celle du prélèvement de gorge, mais en plus :
ensemencer une gélose molle de REILLY qui permet la culture en anaérobiose et incuber à 37o C pendant 24 h.
faire des repiquages sur gélose au sang tous les 04 jours.
L’identification est faite de la même façon que celle du prélèvement de gorge.
Identification
Recherche de la Catalase qui est négative pour les streptocoques.
Recherche de la sensibilité a la bacitracine(les Streptocoques de groupe A sont sensibles a cet antibiotique) c’est à dire pas de culture autour des colonies.
Recherche de la résistance à l’optochine (les Streptocoques de groupe A sont résistants à l’optochine ; c'est-à-dire ils poussent même prés du disque d’optochine).
Recherche de la lyse par la bile ou sels biliaires (les Streptocoques de groupe A ne sont pas lysés) caractère différentiel avec Streptocoque pneumoniae qui est lysé par la bile.
Diagnostic indirect :
Recherche et titrage de l’antistreptolysine « O » dans le sérum du malade (VN