Lakhasly

La mise en evidence de l'implication du neutrophile dans l'HSC date de 1999, a la faveur de travaux montrant que le recrutement des neutrophiles pendant la phase d'elicitation est indispensable pour le recrutement des LT CD8+.En parallele, la depletion en neutrophile suite a une sensibilisation par le TNCB (abreviation de 2,4,6 trinitrochlorobenzene) altere la migration des DC aux ganglions drainants et affecte ainsi l'activation des LT. Ils ont egalement montre que la depletion en neutrophiles pendant la phase de sensibilisation etait suffisante pour inhiber fortement l'HSC (247).En 2010, une etude originale a montre que l'expression du recepteur Nod-like 12 (NLRP12) est necessaire pour ameliorer la capacite migratoire des neutrophiles et des DC dans deux modeles d'HSC (en reponse a l'oxazolone ou a l'isothiocyanate de fluoresceine).En parallele, une autre etude parue la meme annee a montre que la depletion en neutrophiles par un anti-Ly6G (Clone 1A8) au cours de la phase de sensibilisation ou la phase d'elicitation ne modifie pas la formation des agregats de DC (clusters) dans l'HSC induite par le DNFB (257).En 2012, l'equipe de Robert L. Fairchild a demontre que les expressions du Fas Ligand et de la perforine par les neutrophiles sont indispensables pour la migration des LT effecteurs a travers la barriere vasculaire pendant la phase d'elicitation d'une HSC induite par le DNFB (255).L'equipe a ainsi montre que les neutrophiles sont recrutes massivement a la peau pendant la phase de sensibilisation en reponse aux mastocytes et y produisent des FRO, des enzymes proteolytiques telles que la gelatinase et des cytokines indispensables pour l'HSC telles que l'IL-1?61 Un peu plus tard, en 2015, l'equipe allemande de Stephane Martin a participe a une etude qui se basait non seulement sur la strategie de depletion par les anticorps anti-Ly6G (Clone 1A8), mais
aussi sur un modele murin portant une modification genetique.Cette meme hypothese a ete testee par Christensen et al., mais le lot de souris dedie a la validation de cette hypothese a eu trois injections d'anticorps depletant au lieu d'une seule injection avant la sensibilisation: une premiere au jour -1 avant la sensibilisation, une deuxieme au jour J-1 et une troisieme au jour J+1 apres l'elicitation (256).Puis, en utilisant un anticorps plus specifique (anti-Ly6G, clone 1A8) pour la depletion des neutrophiles chez la souris, ils ont reevalue l'effet de l'absence des neutrophiles sur l'inflammation cutanee dans l'HSC.Ainsi, les souris deficientes en NLRP12 developpent une faible inflammation cutanee sans alteration detectable de l'activation de l'inflammasome et de la production des cytokines cles de l'HSC comme l'IL-1?Il s'agit du modele LysMCre/Cre Mcl 1flox/flox presentant un deficit selectif en neutrophiles qui ont besoin de la proteine anti-apoptotique Mcl-1 (abreviation de myeloid cell leukemia-1) pour assurer leur survie.En revanche, la seule presence de neutrophiles et

        60 

de l'haptene au niveau de la peau ne suffit pas pour induire une HSC en l'absence des LT specifiques.et d'IFN-?et le CXCL2.(254).

La mise en évidence de l’implication du neutrophile dans l’HSC date de 1999, à la faveur de
travaux montrant que le recrutement des neutrophiles pendant la phase d’élicitation est
indispensable pour le recrutement des LT CD8+. Le recrutement de ces neutrophiles est
essentiellement dépendant du CXCL1 secrété par les kératinocytes. En effet, cette étude a montré
que l’HSC est inhibée en absence du CXCL1, alors que l’injection intradermique de neutrophiles
permet de rétablir un recrutement normal des LT CD8+ spécifiques de l’haptène. A l’époque, les
auteurs de l’étude ont conclu que l’infiltration en neutrophiles facilitait le recrutement des LT CD8+
pendant la phase d’élicitation (251).

Deux ans plus tard, la cinétique du recrutement des neutrophiles à la peau a été décrite chez des
patients allergiques. En effet, 24 heures après l’application de l’allergène, l’œdème au niveau de
l’épiderme augmente parallèlement à l’infiltration des lymphocytes T, des monocytes/macrophages
et des neutrophiles. Parmi ces 3 populations, les LT forment la population prédominante alors que
les neutrophiles sont les moins représentés. Les chimiokines prédominantes dans les heures suivant
l’élicitation sont CCL2 et CCL5 (252).

En 2004, une étude plus approfondie a confirmé le lien étroit entre les neutrophiles et les LT CD8+
pendant la phase d’élicitation. La déplétion des neutrophiles par injection d’anticorps anti-Ly6G
(Clone RB6.8C5) avant l’élicitation, supprime le recrutement des LT effecteurs en réponse à
différentes concentrations du DNFB. De même, l’injection de neutrophiles à la peau pendant
l’élicitation potentialise la réponse inflammatoire. En revanche, la seule présence de neutrophiles et

        60 

de l’haptène au niveau de la peau ne suffit pas pour induire une HSC en l’absence des LT
spécifiques. Cette étude a donc mis en évidence la capacité des neutrophiles à guider la réponse T
spécifique indispensable pour l’induction de l’HSC (253).

En 2010, une étude originale a montré que l’expression du récepteur Nod-like 12 (NLRP12) est
nécessaire pour améliorer la capacité migratoire des neutrophiles et des DC dans deux modèles
d’HSC (en réponse à l’oxazolone ou à l’isothiocyanate de fluorescéine). Ainsi, les souris déficientes
en NLRP12 développent une faible inflammation cutanée sans altération détectable de l’activation
de l’inflammasome et de la production des cytokines clés de l’HSC comme l’IL-1β (254).

En 2012, l’équipe de Robert L. Fairchild a démontré que les expressions du Fas Ligand et de la
perforine par les neutrophiles sont indispensables pour la migration des LT effecteurs à travers la
barrière vasculaire pendant la phase d’élicitation d’une HSC induite par le DNFB (255).
Peu après, en 2014, Christensen et al. ont apporté des éléments nouveaux dans l’implication des
neutrophiles dans l’HSC. D’une part, cette équipe a montré que le G-CSF contribue au recrutement
des neutrophiles à la peau pendant la phase d’élicitation d’une HSC induite par le DNFB. Tout
d’abord, ils ont montré que le nombre de neutrophile augmente dans le sang et la peau des souris
quelques heures après l’élicitation. Puis, en utilisant un anticorps plus spécifique (anti-Ly6G,
clone 1A8) pour la déplétion des neutrophiles chez la souris, ils ont réévalué l’effet de l’absence des
neutrophiles sur l’inflammation cutanée dans l’HSC. Ainsi l’injection de ce clone, n’affecte ni la
concentration d’IL-β et d’IFN-γ ni le nombre des LT CD8+ dans la peau et les ganglions drainants.
Ces résultats ont donc remis en question les résultats de l’équipe américaine de Fairchild et montré
que le rôle des neutrophiles dans l’HSC était peut-être surestimé (256).
En parallèle, une autre étude parue la même année a montré que la déplétion en neutrophiles par un
anti-Ly6G (Clone 1A8) au cours de la phase de sensibilisation ou la phase d’élicitation ne modifie
pas la formation des agrégats de DC (clusters) dans l’HSC induite par le DNFB (257).

        61 

Un peu plus tard, en 2015, l’équipe allemande de Stéphane Martin a participé à une étude qui se
basait non seulement sur la stratégie de déplétion par les anticorps anti-Ly6G (Clone 1A8), mais

aussi sur un modèle murin portant une modification génétique. Il s’agit du modèle LysMCre/Cre Mcl
1flox/flox présentant un déficit sélectif en neutrophiles qui ont besoin de la protéine anti-apoptotique
Mcl-1 (abréviation de myeloid cell leukemia-1) pour assurer leur survie. L’équipe a ainsi montré
que les neutrophiles sont recrutés massivement à la peau pendant la phase de sensibilisation en
réponse aux mastocytes et y produisent des FRO, des enzymes protéolytiques telles que la
gélatinase et des cytokines indispensables pour l’HSC telles que l’IL-1β et le CXCL2. En parallèle,
la déplétion en neutrophile suite à une sensibilisation par le TNCB (abréviation de 2,4,6
trinitrochlorobenzene) altère la migration des DC aux ganglions drainants et affecte ainsi
l’activation des LT. Ils ont également montré que la déplétion en neutrophiles pendant la phase de
sensibilisation était suffisante pour inhiber fortement l’HSC (247). Cette même hypothèse a été
testée par Christensen et al., mais le lot de souris dédié à la validation de cette hypothèse a eu trois
injections d’anticorps déplétant au lieu d’une seule injection avant la sensibilisation: une première
au jour -1 avant la sensibilisation, une deuxième au jour J-1 et une troisième au jour J+1 après
l’élicitation (256).